Що таке конфокальний оптичний мікроскоп?

Конфокальна мікроскопія надає можливість збирати чіткі зображення з тонкої ділянки товстого зразка з низьким фоном і мінімальними перешкодами поза фокусом. Оптичне розрізання є поширеним застосуванням у біомедичних науках і також було корисним для матеріалознавства.

Останнім часом конфокальний мікроскоп став незамінним інструментом для біологів вивчати будову клітини та її функції. Confocal забезпечує безпрецедентні мікроскопічні деталі складної морфології та динаміки клітин і тканин за допомогою надзвичайно високоякісних зображень із надвисокою роздільною здатністю.

Усуваючи непотрібне розсіяне світло ззовні фокальної площини та придушуючи розсіяне світло, конфокальна мікроскопія покращує бічну роздільну здатність на 30% порівняно зі звичайною оптичною мікроскопією. Це створює зображення, які легко бачити з меншим розмиванням.

Конфокальна мікроскопія може неінвазивно візуалізувати зміни на клітинному рівні. Ця техніка була використана окреслити зміни при задній поліморфній дистрофії рогівки (PPCD), ендотеліальній дистрофії Фукса, дистрофії Боумена та стромальній дистрофії рогівки.

На відміну від звичайної світлової мікроскопії, справжня конфокальна візуалізація вимагає освітлення однієї точки якомога дрібнішої. Діаметр плями регулюється хвильовою оптикою і досягає обмеженого дифракцією мінімуму при d ≈ λ/NA. Детальний розподіл інтенсивності описується функцією розподілу точок.

Основний принцип конфокальної мікроскопії полягає в тому оптика освітлення та детектування фокусується на тій самій діфракційно обмеженій точці, яка переміщується над зразком для створення повного зображення на детекторі.