Як працює аналіз Luminex?
Використовуючи прилад Luminex, кульки збуджуються одним лазером для визначення області кульки та відповідного призначеного аналіту. Інший лазер визначає величину сигналу, отриманого від ПЕ, який пропорційний кількості зв’язаного аналіту. Кілька зчитувань береться на кожній ділянці кульки, що забезпечує надійне виявлення.
Зразок додають до суміші кольорових кульок, попередньо вкритих специфічними антитілами для захоплення аналіту. Антитіла зв'язуються з аналітами, що представляють інтерес. Біотинільовані антитіла для виявлення, специфічні для аналітів, що цікавлять, додаються та утворюють сендвіч антитіло-антиген.
Основні відмінності між аналізами ELISA та LUMINEX полягають у використанні різних систем захоплення мішені та різних репортерних систем. Аналіз LUMINEX захоплює мішені на сферичні кульки в суспензії, тоді як ELISA зазвичай покладається на плоскі поверхні багатолункових планшетів для захоплення мішеней.
Протокол аналізу Luminex
- Підготуйте всі реагенти згідно з інструкцією.
- Додайте 50 мкл стандарту або зразка* в кожну лунку.
- Додайте 50 мкл розведеного коктейлю мікрочастинок у кожну лунку. …
- Промийте, видаливши рідину з кожної лунки, заповнивши 100 мкл промивного буфера та знову видаливши рідину.
Метою проточної цитометрії є ідентифікація конкретних типів клітин і кількісна оцінка рівнів експресії певних антигенів/білків, асоційованих із клітинами/частками. Однак метою luminex є кількісне визначення аналітів (наприклад, цитокінів) у ваших зразках.